子宫性不孕授精的方法

　　（一）精子标本的制备
　　为了提高受孕机率，减少人工授精并发症，在行IUI前必须制备精子标本。制备精子标本目的之一是使标本中活动精子的浓度处最佳状态，特别对少精症尤其如此；其二在于减少精浆量，因为精浆中含有抑制正常生育力的因素和引起子宫颈挛性疼痛的前列腺素。在患生殖道炎症的病人中，还可能含有免疫功能细胞和抗精子抗体。无论采用何种方法制备精子标本，为避免痉挛性疼痛和感染，通常只用小（0.1~1.0ml）。部分病例于授精前标本中加抗菌素。
　　部分研究者采用分步射精的第一部分作为授精标本。大多数病人第一部分标本。大多数病人第一部分含有高密度精子，目前前列腺素水平低。Farris检测了98名病人的全部射精和分步射精的活动精子数目。所有病例中，分步射精的第一部分较全的活动精子数高，其中89例第一部分所含活动精子的数量与第二部分的比例为7.4:1，而其余10名病人则第二部分精子数较高（4.5:1）。结果表明了检测两部分精子量的重要性，以便在授精时使用较高浓度的部分。
　　制备通常是将收庥在清洁瓶内，用无菌Tyrode溶液(pH7.4)以1:1的比例稀释，然后离心1300g，15分钟。离心后倒去悬浮液，将沉淀的精子团块用Tyrode液洗涤备用。
　　增加活动精子百分率的方法有人血浆白蛋白（HAS）柱过滤与精子移动法。HAS柱过滤是将洗涤后的悬液放入HAS柱，使精子碎片和Y精子分隔，60～90分钟后，洗涤远端精子并再悬于Tyrode液中进行人工授精。根据柱上层数不同，SHA可分为单层柱法和双层柱法；单层柱法活动精子百分率从35%提高到60%，而回收率为28%；双层柱法从41%到85%，但只能回收13%。Dmowski发现，双柱法用于21对夫妇无1对受孕，而用单层法的12对夫妇中4对受孕，成功者授精期所用活动精子为64%~85%。可见双层柱法似不可取。
　　精子移动法是在上加一层培养液，活动精子游入该层后回收，此法简单，但培养液很关键，它是人输卵管液的电解质及其它各种成份的种类、浓度配成的人工生殖细胞培养液。经过5%CO2的气体处理，pH调整在7.6±0.1，渗透压295～300mosmoles/kg。具体操作是用多个9×75mm的无菌圆底试管（1ml用试管20支），每支试管加入培养液0.8ml，然后用一无菌针管将未经处理的清洁轻轻地注入每支试管底部。每管均注入0.05ml，经一定时间温孵后，收集培养液进行一次离心（800g,15分钟）以得到高浓度的活精子，该法可使活动精子百分率提高1.75~3.2倍，但回收率仅占原活动精子的2～11%。
　　（二）宫内注入精子
　　用一导管将精子直接注入宫腔。导管有多种类型，如儿科胃管、Feflon静脉内导管和一种专为IUI制作的导管。使用的导管必须能通过子宫颈管到达宫腔而不引起宫颈的隐窝、上皮或子宫壁损伤。选好导管后，用一固定在导管末端的注射器制备好的精子标本经导管注入宫内。该注入法常会遇到技术上的困难，特别是在子宫颈狭窄、严重的后位或前位子宫时，故要求专人操作。对重复受精者，应记录位置、插入角度和所用导管类型。一些学者建议在怀疑有抗精子抗体或不良宫颈粘液时，应去除宫颈粘液，但未有资料证明这些手段可改善妊娠率。
　　（三）授精时间的确定
　　对计划受精者可采用许多方法预测排卵期，使之能在排卵期左右进行人工授精。目前常用的预测法有5种：1、记录基础体温（BBT）；2、宫颈粘液分析；3、阴道细胞学检查；4、超声波检测卵泡大小；5、排卵前血浆黄体生成素（LH）和雌二醇（E2）水平测定。上述方法呆单独使用或结合使用。对月经周期不规则的病人用克罗米芬枸椽酸盐和人绒毛膜促性腺激素（HCG）等诱发排卵。Mastroianni等用BBT图在回顾性研究中指出104个IUI病人只查出68人的排卵时间，说明BBT只能部分预测IUI时间，尽管如此BBT仍是最常用的预测授精时间的方法。
　　多次授精可弥补预测排卵期不精确的缺陷，以预计BBT升高前2~3天开始授精，或授精的同时给E2直到排卵指标出现。重复授精可以增加卵子与精子的接触机会。Barwin和Glezerman采用重复授精获得满意结果（分别为65%和52%）。
　　（四）授精周期
　　成功的授精平均治疗期需3.5周期（3~5.1）。Wiltbank注意到仅当病人接受3次以上治疗时，成功率由17%增至33%，从而总结出IUI治疗至少需进行3次。